琼脂糖凝胶电泳法实验结果的分析与讨论（琼脂糖凝胶电泳的实验步骤）

作者：admin 时间：2023-10-16 10:23:16 阅读数：63人阅读

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1、不同DNA有自己相应的条带，比如基因组DNA是一条，质粒一般是2条。而不同大小的DNA有不同位置，越靠前的电泳速度快说明size小，和ladder比较就可以判断自己DNA大小。

2、了解目的条带是多大，mark的条带是多大，看基因大小是否符合。目的条带是否清晰，有无拖尾等现象，mark跑的是否清晰，能否表征条带的大小。根据电泳中是否使用支持介质分为自由电泳和区带电泳。

3、想分析这种结果，首先，写明你在做什么样的实验，使用的是什么材料、什么技术，实验目的是什么。其次，写明每块胶浓度多少，每个加样孔里是什么样品，marker每条带对应的是多大的DNA。

琼脂糖凝胶电泳法实验结果的分析与讨论（琼脂糖凝胶电泳的实验步骤）

1、将提取出的质粒DNA与DNA marker一同加入琼脂糖凝胶孔中，按其大小经过电泳处理，通电30-60min。取出琼脂糖凝胶，用紫外灯照射，观察DNA条带的形态和大小，并测量目的DNA条带的大小。

2、实验二质粒DNA的酶切鉴定及琼脂糖凝胶电泳实验目的和要求学习和掌握限制性内切酶的特性、酶解和琼脂糖凝胶电泳的操作方法，并理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具，琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定DNA片段的有效方法。

3、从宿主细胞中提取质粒DNA，是DNA重组技术中最基础的实验技能。分离质粒DNA有三个步骤：培养细菌使质粒扩增，收集和裂解细菌，分离和纯化质粒DNA。在质粒提取过程中，由于机械力、酸碱度、试剂等的原因，可能使质粒DNA链发生断裂。

4、我个人更倾向于认为是超螺旋开环复制中间体（两个质粒未分离）。因为，我们实验室把质粒提取物进行彻底单酶切发现，单酶切产物的条带非常整齐、单纯，没有拖带现象。

5、用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒DNA。琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应，DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。

6、琼脂糖电泳进行鉴定质粒DNA时，多数情况下你能看到三条带，但千万不要认为你看到的是超螺旋、线性和开环这三条带。

1、了解目的条带是多大，mark的条带是多大，看基因大小是否符合。目的条带是否清晰，有无拖尾等现象，mark跑的是否清晰，能否表征条带的大小。根据电泳中是否使用支持介质分为自由电泳和区带电泳。

2、在pH值高达16的碱性条件下，线性的DNA因氢键断裂，双螺旋结构解开而变性，尽管在这样的条件下，共价闭环质粒DNA的大部分氢键会被断裂，但超螺旋共价闭合环状的两条互补链相互缠绕，不会完全分离。

3、在琼脂胶中不同的长度的片段跑的距离不同，通过比较用以初步确定样品中DNA片段的大小。如下图，最左边的是Maker，其他的是样品。具体操作、原理可以参考《分子克隆操作指南》，或者百度“琼脂糖凝胶电泳”。

4、小时完全降解1 mg λDNA 的酶量为一个单位，但是许多实验制备的DNA 不象λDNA 那样易于降解，需适当增加酶的使用量。反应液中加入过量的酶是不合适的，除考虑成本外，酶液中的微量杂质可能干扰随后的反应。

5、“ 琼脂糖浓度一个给定大小的线状DNA分子，其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。

6、那是他们提取的时候变性时间太长，变性的质粒DNA电泳的时候走在超螺旋DNA的前面，染色较淡。变形的原因通常是上样量太大，也有可能是凝胶、缓冲液的原因。

1、这应该是对提取的DNA进行的电泳，上面亮的带是DNA，下面稍暗的是RNA 提取效果很好，DNA完整无弥散现象，RNA很少只需加少量酶去除。

2、如果DNA完整，电泳结束在紫外线下会看到一条清晰的条带。

3、将提取出的质粒DNA与DNA marker一同加入琼脂糖凝胶孔中，按其大小经过电泳处理，通电30-60min。取出琼脂糖凝胶，用紫外灯照射，观察DNA条带的形态和大小，并测量目的DNA条带的大小。

4、一条最好（超螺旋），三条（超螺旋，线性，开环）也可以。

酶切时所加的DNA 溶液体积不能太大，否则DNA 溶液中其他成分会干扰酶反应。

dna电泳的条带在紫外灯下才能看，dna电泳的原理是不同长度的dna片段在同样电场力作用下，在琼脂糖胶中迁移的距离不同，长度越小迁移距离越快，也就是说片段越小越在胶的下部。

质粒DNA原则上是一条带，但通常跑胶会看到三条，这是正常情况。因为质粒是环形的DNA，稍有降解就会变成一条为线性，再厉害些，就成了线性DNA，三者在琼脂糖凝胶中速率不同，自然会出现三条带。

检查你的梳子，很可能是没有洗干净导致点样孔内有杂质造成条带弥散。还有是你的胶融化的不充分，或者凝结不充分。请保证煮沸两次以上。凝固时凝固半小时以上。

凝胶电泳分析只能定性，不一定非常准确，尤其是条带的大小判断，主要还是要测序以及酶切才能检验结果。

条带过宽或者不清晰是因为DNA被降解了或者是凝胶没做好。