细胞转染效率的影响因素(细胞转染效率的影响因素有)

作者:admin 时间:2023-11-12 04:57:29 阅读数:6人阅读

本文目录一览:

血清存在下为什么会影响转染效率

1、你要看你的转染试剂的说明书,有些转染试剂不需要去除血清,有些需要无血清培养基,条件不一样的。你最好仔细看看转染试剂的说明书。在转染的时候去除血清是为了提高转染效率。

2、血清的存在会干扰siRNA与转染试剂的混合,从而影响转染效率。建议用来稀释siRNA和稀释转染试剂的培养基是无血清培养基。

3、血清:血清中含有大量的蛋白质,可能会降低转染效率。一般的转染试剂会要求转染时使用无血清培养基进行转染,转染完成后更换完全培养基。

4、血清 对转染的影响:血清中含有大量的蛋白质,在转染过程中,带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体对核酸的吸附,影响转染效率。

细胞铺板密度、血清、抗生素分别对转染有什么影响?

1、血清 对转染的影响:血清中含有大量的蛋白质,在转染过程中,带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体对核酸的吸附,影响转染效率。

2、不可以。细胞铺板需均匀,避免细胞成团、细胞死亡,影响转染效率,所以铺板不均匀不可以进行转染。转染是真核细胞主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。

3、如果转染时铺板密度较高,细胞一方面转染效果不理想,直接影响沉默效果和数据可靠性,另一方面,48小时甚至更长时间后,沉默检测最佳点时,过于密集的细胞将影响细胞状态,从而影响实验结果。

4、转染6~8 h内,要使用无抗培养基。因为抗生素对细胞有毒性,会影响siRNA的递送效果。 保证健康的细胞状态 使用传代50代内的细胞进行实验,传代太多的细胞转染效率会下降。

5、对于生长缓慢的细胞,倍增时间为36小时(如原代细胞)。 (4)转染当天,将细胞铺板。如果在转染前一天或更早时间铺板,转染效率可能下降,如果是简单细胞系的转染,可以直接在前一天晚上铺板,第二天来转染。

lo2细胞转染效率

1、转染效率是转染时的成功率,表达量是蛋白质的量。当细胞密度达到60%~80%时进行转染可以取得较高的转染效率,过低或过高都会影响转染效果。表达量是当某基因的长度较长时,匹配到该基因的reads数目也应该越多。

2、病毒感染细胞本来效率就较低,一定要注意以下几点:感染时的培养基尽量少些; 每1ml的培养基中加入5-10ul的Polybrene(储存液浓度为2mg/ml ),可以提高效率约3-5倍。

3、细胞状态:维持细胞生长及健康旺盛是提高转染效率的重要条件。建议选择对数生长期的细胞为佳,此时期的细胞生长旺盛,可能得到更高的转染效率,切勿选择传代次数过多,基因型可能发生改变的细胞。

4、其中,RFect质粒DNA转染试剂主要用于贴壁细胞的质粒转染,转染效率在贴壁细胞中可高达90%以上,完全媲美Lipofectamine3000的质粒转染效率。

5、转染效率的高低主要与细胞自身相关,同等实验条件下,每次转染细胞转染效率应该是相近的,因此可以不必每次都做。但如果每次实验都做一个荧光对照组,将会更加便于排除一些实验问题。