内参抗体的稀释比例研究

1. pcr核质分离步骤？

pcr核质分离步骤？

核质分离

核质分离是检测某种RNA或蛋白质在细胞质和细胞核中含量的一种方法，根据细胞膜和核膜溶解的难易用不同强度的裂解液溶解细胞，达到细胞质和细胞核物质分离的效果。分离的产物通过q-pcr或WB分别检测目的RNA或蛋白在细胞质和细胞核中的含量。

核质分离质控标准：

核质分离提取RNA用actin和U6的mRNA作为内参，actin mRNA基本位于细胞质中，U6 mRNA基本位于细胞核。分离的RNA产物用actin和U6进行q-pcr检测，确定核质分离是否成功。

核质分离提取蛋白用Histone和GAPDH作为内参标准，Histone基本位于细胞核内，GAPDH基本位于细胞质中。分离提取的蛋白产物分别用Histone和GAPDH抗体进行WB检测核质分离分离是否成功。